寿胎丸对复发性流产大鼠蜕膜水通道蛋白的影响

Recurrent abortion is a common pathological pregnancy，previous studies (30973771, 81273797) have proved that ShouTaiWan can adjust the expression of recurrent abortion decidual tissue of mice protein and maintain pregnancy is one of the mechanisms of tocolysis.Based on such conclusion,with corpus luteum inhibition due to kidney deficiency model of rats and mice abortion decidual cells as subjects, with Shoutai Pill and active ingredients as subjects,with water channel protein as an effect index.Using the technology of RT-PCR, immunohistochemistry, Western Blotting Technology, the primary cell culture methods ,bioinformatics and other modern technology and methods,to make clear that the different expression and distribution of localization of aquaporin isoforms in recurrent abortion rat decidua,to investigate the maternal fetal interface fluid transport regulation pathway and the effect of ShouTaiWan intervention,to expounds the correlation new mechanism between Bushen herbs and "kidney controlling water",to lay the foundation of development of modern traditional Chinese Medicine for the prevention of recurrent abortion, and to provide new research ideas for prevention of recurrent spontaneous abortion.

复发性流产是常见的病理性妊娠，前期研究(30973771、81273797)用蛋白质组学实验证明了寿胎丸能调整复发性流产小鼠蜕膜组织蛋白的表达而维持妊娠是安胎的机制之一。本研究在此基础上，以肾虚黄体抑制流产大鼠模型及小鼠蜕膜细胞等为受试对象，以寿胎丸及活性成分为被试因素，以水通道蛋白为效应指标。采用RT-PCR技术、免疫组化技术、Western blotting技术、细胞原代培养方法、生物信息学等现代技术方法，明确水通道蛋白各亚型在复发性流产大鼠蜕膜中的差异表达及分布定位情况，探讨母胎界面液体转运的调节通路及寿胎丸干预作用，阐明补肾中药安胎与"肾主水"相关性的新机制，为防治复发性流产开发出现代中药奠定基础，并为中药防治复发性流产提供新的研究思路。

背景：复发性流产（RSA）是一种常见的病理性妊娠，发生率高，严重危害了妇女的生殖健康。本课题以水通道蛋白（AQP）为效应指标。探讨寿胎丸治疗RSA机制，提高中药防治RSA的水平，对人类生殖、生殖健康均具有重要的现实意义。.方向：应用科学技术方法，筛查水通道蛋白各亚型在复发性流产小鼠蜕膜中的差异表达及分布定位情况，探讨母胎界面液体转运的调节通路及寿胎丸干预作用，阐明补肾中药安胎与“肾主水”相关性的新机制。.完成情况：按任务书的要求，采用RT-PCR技术、免疫组化技术、Western blotting技术、细胞原代培养方法、生物信息学等现代技术方法，明确水通道蛋白各亚型在复发性流产大鼠蜕膜中的差异表达及分布定位情况，探讨母胎界面液体转运的调节通路及寿胎丸干预作用。取得结果：RT-PCR方法结果显示寿胎丸及E2、P均能显著提高AQP1、2、5、8mRNA的表达（P＜0.05）。Western blot方法检测蜕膜细胞的结果显示：寿胎丸及P均能显著提高AQP1、2、5、8蛋白的表达（P＜0.05）；除AQP1外，E2能显著提高AQP2、5、8蛋白的表达（P＜0.05）。寿胎丸与P对AQP2蛋白表达的影响无差异，P比寿胎丸更显著上调AQP1、5、8蛋白的表达（P＜0.05）。用Western blotting技术检测各组孕鼠子宫蜕膜组织水通道蛋白表达的情况。寿胎丸能够有效降低复发性流产大鼠的胚胎吸收率，促进胚胎正常发育，能够下调复发性流产大鼠子宫蜕膜组织中AQP0的表达，同时上调AQP1、AQP2、AQP3、AQP4、AQP5、AQP6、AQP8、AQP9、AQP10、AQP11蛋白表达。结论：寿胎丸可能调节AQP各亚型的表达使其对水分子的通透性发生改变，进而调节母胎界面水液转运平衡而维持妊娠，更加证实AQP可能是“肾主水”的微观分子生物学基础。.取得成果：公开发表论文7篇，待发表论文2篇。已培养硕士1名。